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                          ELISA吸光度值衰減探究
                          點擊次數:344 更新時間:2023-04-20

                            在做elisa試劑盒實驗的時候,ELISA吸光值一直在衰減這樣的現象。在加完顯色液(購買)顯色一定時間后,再加終止液(2M H2SO4,自己配制)后,立即測試其吸光度值,等過幾分鐘再測試吸光度值,發現兩次測得的吸光度值發生衰減。第二次均小于次。并且,加終止液時,從條加到第12條后,測試發現,吸光度值從1-12條逐級衰減。前提是這12條酶標板都是同一種產品,并且包被相同蛋白。原來ELISA吸光度值衰減可以這樣巧妙應對。      

                            其實具體的原因也很簡單,有可能是顯色液的質量不夠好。一般情況下,終止反應后OD值的下降前期不是很明顯。終止后,吸光度值是會隨著時間衰減,所以一般是加完終止液后立即測,這樣比較準。再次分析12條顯示逐級遞減的原因看看是否是:

                          1、 顯色時間調整,如果你現在的顯色時間是10MIN,那調整到30MIN,再加終止液,觀察上述現象是否出現。    

                          2、 終止液中加入少量甘油看下怎么樣。建議您使用RD品牌的ELISA試劑盒,顯色時間是30分鐘,終止后要求在30分鐘內檢測,加入終止液后,在加入終止液后2到3分終內檢測,這是OD值相對比較高。擬合值能達到四個9。



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