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                          曲霉屬通用PCR試劑盒注意事項與要求
                          點擊次數:879 更新時間:2020-12-09

                          曲霉屬通用PCR試劑盒注意事項:

                          ①加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

                          ②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

                          ③按照曲霉屬通用PCR試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

                          ④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

                          ⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

                          ⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。

                          ⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

                          ⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

                          ⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

                          曲霉屬通用PCR試劑盒樣本處理及要求:

                          1.  血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

                          2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

                          3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

                          4.  細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

                          注:標本溶血會影響*后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

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