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                          禽波氏桿菌PCR試劑盒安全性的方法
                          點擊次數:906 更新時間:2020-11-11

                          禽波氏桿菌PCR試劑盒試驗原理:

                          禽波氏桿菌PCR試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。

                          禽波氏桿菌PCR試劑盒安全性:

                          1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

                          2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

                          3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

                          4. 禽波氏桿菌PCR試劑盒應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

                          5. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

                          6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

                          7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。

                          8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

                          9. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

                          10. 底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

                          11. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

                          12. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

                          禽波氏桿菌PCR試劑盒操作程序:

                              1. 棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復5次,拍干。

                              2. 每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。。

                              3. 取出酶標板,每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

                              4.測定:以空白孔調零,在450nm波長下測量各孔的吸光度值(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

                              5.根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用禽波氏桿菌PCR試劑盒各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了的,其實際濃度應該乘以總稀釋倍數。

                           

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